在生物制藥領域，層析純化是關鍵步驟，親和層析介質循環使用次數直接影響分離提純效果。根據不同產品特性和物料性質，介質壽命均不相同。
本文以金屬螯合鎳親和介質為例，通過金屬螯合親和介質的原理與使用方式，來檢測介質壽命。金屬螯合親和介質捕獲蛋白質表面的氨基酸，分離出對金屬離子有吸附作用的多肽、蛋白和核苷酸。針對其純化原理，研究介質壽命驗證方法與清洗檢測，為研究不同用途的層析介質壽命提供思路與數據支持。
介質壽命驗證是藥品研發，尤其是生物制品的重點關注內容。企業在做介質壽命驗證時，建議采用等比例縮小純化規模，確定每步純化所用介質的使用次數，確保親和層析介質壽命在使用期限內使用，介質符合生產需求，防止交叉污染，保障產品的質量合格。
親和層析介質在每次使用時，未被洗脫和流穿的物質或雜質會吸附在填料上，需要采用特定的清洗和再生程序對層析介質進行清洗、再生、保存，以恢復介質開始的狀態。長期使用的介質，會逐漸失去效力，如清洗后污染物殘留量、介質使用參數變化、產品重要指標（純度）和收率均不在控制范圍之內，則說明介質的壽命已到期。
親和層析是一種吸附層析，抗原（或抗體）和相應的抗體（或抗原）發生特異性結合，而這種結合在一定的條件下又是可逆的。所以將抗原（或抗體）固相化后，就可以使存在液相中的相應抗體（或抗原）選擇性地結合在固相載體上，借以與液相中的其他蛋白質分開，達到分離提純的目的。
與產品實際生產的SOP作對比，如不在SOP控制范圍內，則說明介質應該更換了，只有對親和層析介質進行及時更換，才能確保生物制品質量。
本次研究結果顯示，TOC檢測值范圍在22.700～262.000ppb之間，RSD為77.027%；pH檢測值范圍在5.400～6.900之間，RSD為7.103%；內毒素檢測值范圍在0.600～1.100EU/mL之間，RSD為9.443%；蛋白未檢出，電導均＜0.25μs/cm；TOC洗脫峰圖波動明顯，pH洗脫峰圖稍有波動，但都電導洗脫峰圖相對平穩。
結果表明，雖然TOC和pH峰圖存在一定波動，但其檢測值均處于正常標準范圍內，另外內毒素作為輔助參考指標，zui高值達到1.100EU/mL，已超出標準范圍，但檢測難免存在誤差，經計算內毒素平均值僅為0.967EU/mL，符合標準范圍。
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更新時間：2023-02-10
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