鎳Ni柱具有很高的穩(wěn)定性和兼容性，兼容還原性試劑、變性劑、洗滌劑、以及其它添加物。適用于純化可溶性蛋白和包涵體蛋白。為了讓大家更多的了解Ni柱，這里給大家簡(jiǎn)單介紹一下如何根據(jù)實(shí)際需求自己填裝Ni層析柱。

　　

　　操作方法：

　　

　　1、輕輕將鎳Ni柱懸浮在水中，沉降后沉積物體積要達(dá)到35ml。自然沉降，不要用磁力攪拌器以免打碎微球。

　　

　　2、將Ni樹(shù)脂轉(zhuǎn)移到砂芯漏斗中，用50ml純水洗滌四次，除去儲(chǔ)存液中的乙醇等物質(zhì)，以純水保存至50ml總體積。

　　

　　3、用純水清洗空色譜柱，然后關(guān)閉出口閥門，保留1cm高的液面。

　　

　　4、通過(guò)玻璃三角漏斗將步驟2的樹(shù)脂泥漿倒入色譜柱中，用純水將柱子填滿。

　　

　　5、在柱子頂端安上接頭并將之與泵連接，以一定的流速13ml/min（或400cm/h）。不要超過(guò)規(guī)定的樹(shù)脂或柱子的使用壓力。

　　

　　6、保持流速，體積穩(wěn)定后再流3倍柱體積。標(biāo)記柱床高度。

　　

　　7、關(guān)閉流速，關(guān)掉鎳Ni柱的出口。斷開(kāi)頂端接頭與泵，將頂端接頭移至標(biāo)記處，固定接頭。

　　

　　8、用1倍柱體積的0.1M硫酸鎳以5ml/min流經(jīng)柱子。

　　

　　9、用10倍柱體積的水以10ml/min洗掉未結(jié)合的Ni離子。

　　

　　10、如果柱子不馬上使用，用20%乙醇以10ml/min的流速洗滌四倍柱體積后保存。